actin作为内参的原理（核糖体rna可以在实时定量实验中做内参基因吗）

actin作为内参的原理

actin作为内参的原理如下：

Actin是一种细胞骨架蛋白，它在许多生物体的细胞中起着关键作用。在某些实验中，使用Actin作为内参物质，是为了对实验中基因表达水平的变化进行校正。

Actin作为内参物质的原理在于：Actin基因的表达在不同细胞中是相对稳定的，因此它可以在实验中被用作一个参考基因，来比较其他基因的表达水平。具体而言，内参物质的选择要满足以下条件：(1)表达水平相对稳定， (2)在实验样品中表达水平不受处理、分析和采样等因素的影响。

在实验中，内参物质的表达水平被用于校正目标基因与内参基因之间的表达水平差异，从而确定目标基因的相对表达量。通过同时考虑内参物质与目标基因的表达量，可以减小样品间的技术因素对实验结果的影响，提高实验的可重复性和准确性。

actin的解释：

Actin（肌动蛋白）是细胞内广泛存在的细胞骨架蛋白，参与许多细胞进程，如细胞运动、细胞分裂和细胞形态的维持等。它是一种单体半胱氨酸蛋白，可以形成长链和聚集成微丝，也可以通过丝素和交错连接蛋白等中间方子，交联为厚丝和纤维素等结构。

Actin的核心结构是由两个α螺旋结构和一个β折叠结构组成的，其在细胞中的分布和功能的多样性，与微丝和相关蛋白质的互作密不可分。

在许多实验中，Actin常用作内参或标准基因。内参物质是在基因表达实验中用来校正不同样本之间变异的一种基因。Actin通常被认为是基因表达的稳定参考基因，且在细胞中表达量较高，常被用来作为标准化的参考基因，以便定量PCR、免疫印迹和其他实验的准确性。

原核生物的内参基因

原核生物是指没有细胞核的生物，其基因组DNA直接存在于细胞质中。由于缺乏细胞核，原核生物的基因组结构相对简单，大多数基因组是以环状DNA分子的形式存在，这些DNA分子称为质粒（plasmid）。

质粒是原核生物基因组的一部分，其大小通常比细菌染色体小得多，但仍然包含许多重要的基因，例如抗生素抗性基因、代谢途径基因等。

此外，质粒还具有复制和传递到下一代细胞的能力，因此质粒可以被视为原核生物基因组的一种副本，也可以在细菌之间进行基因交换。

与原核生物不同，真核生物具有明确定位于细胞核内的线性染色体。真核生物的基因组大小和复杂性要远远超过原核生物，其中包括大量的非编码区域和基因剪接机制等。

因此，原核生物的基因组结构相对较简单，仅仅依靠质粒就可以完成基本的遗传功能。

核糖体rna可以在实时定量实验中做内参基因吗

1qRT—PCR中内参基因的意义 内参基因是指其表达水平不受研究条件的影响 且可以在多种样本间恒定表达的已知参照基因。用 这个基因的表达水平可以准确量化初始材料的载 量。由于管家基因的表达水平受环境因素影响较 小，并能在生物体几乎全部组织及各个生长阶段持 续表达，所以在试验中通常选用管家基因作为内参 基因

常用的内参基因及其使用范围?请大家推荐生物方面的论坛

内参即是内部参照，它们在各组织和细胞中的表达相对恒定，在检测基因的表达水平变化时常用它来做参照物 你可以去生物帮那里了解这方面的信息，那儿技术文档、视频资源丰富，我很喜欢到那里找想要的东西，而且还有很多软件可以下载，并且有软件的教材。有时间可以去看看。 包括GAPDH 、β- actin(BETA-actin) 、18sRNA、28sRNA 、B2M、ACTB、SDHA、HPRT1、ARBP内参基因 等。 在血清刺激条件下的基因表达定量研究中, B 22MG 和 18SrRNA 作为内参基因是合适的, 而 B 2act in 和GAP 2DH 则不适合。 大鼠是常用实验动物, 老年大鼠在阿尔茨海默症等模型研究中常用。我们针对老年大鼠组织实时老年大鼠肾组织中相对表达最稳定的管家基因是ACTB; 心脏和肺组织中表达最稳定的内参基因是G3pd 内参基因sdha和hprt1适合用于校正目标基因的表达量，为研究幼龄小鼠小肠组织基因表达奠定基础。 可以参考： Click here, Sign in your account www.bio1000.com/zt/dna/225764.html .hope that i can help you 对于枣树基因表达研究的内参基因,组蛋白 ZH j 3基因在不同器官、 不同生长时 期的结果枝及其顶端组织中有表达, 表达最稳定,最适宜用于枣树基因表达研究的内参基因。 HSV感染下用作标化内参基因排序 其研究发现，在应用 pcDNA3.1 载体进行表达研究时，相比之下 GAPDH 作为内参效果更好更为适合和稳定 RT-PCR方法，检测乳腺肿瘤及其邻近乳腺组织中的IL-8mRNA及内参GAPDH的表达水平知乳腺癌组织 高表达IL-8,可作为评价乳腺癌进展 及判断预后 的指标 H MBS 和 C- TBP两个看家基因适用于校正目标基因的表达量,为研究男性乙肝相关肝癌组织中目标基因的表达奠定基础 实时反转录 PCR研究应使用至少两个内参基因以确保结论可靠: 其一可以是某种核糖体 RNA(例如 18S r RNA), 用来对 RNA总量和转录步骤中可能发生的降解进行必要校正; 第二个内参基因应和目的基因 mRNA表达水平接近。Arb p 细胞丰度相对最低、 表达相对最稳定且在不同组织间差异最小,相对较适用于老年大鼠组织间 mRNA表达变化分析。

内参基因拷贝数185000啥意思

内参基因拷贝数185000表示内参基因有92500个。内参基因拷贝数是指细胞中某个基因的拷贝数量。一个细胞中每个基因都有两个拷贝，即一个来自于母亲，一个来自于父亲。如果某个特定基因在细胞中存在多个拷贝，内参基因就是185000/2=92500。

内参基因与目的基因的Ct值相差很大是什么原因

不同基因之间表达量差异很大，可达上千甚至上万倍之差，所以CT值差10以内属正常现象，但通常选用内参基因属于表达量较高的持家基因，如果目标基因和内存基因表达量（CT值差）过大，用内参基因来衡量目标基因的表达量（绝对值）就不完全可靠，但至少可以说明目标基因表达非常低。

如何选择并调整内参基因

最近我做了荧光定量PCR，每次做的时候溶解曲线效果就很差，不是单一的峰，说明是有非特异性的扩增，但是在普通PCR仪上做的PCR时，只显示了一条带，很清晰，是怎么回事啊?荧光定量的灵敏度太大了么?还有斑马鱼的内参基因怎么选取?做的是相对定量。答：你说对了，荧光定量的灵敏度太大了。你要明白件事情，EB染色的情况下，在电泳上要形成一个条带的前提是存在5ng的DNA,也就是，如果你的非特异性扩增产物低于5ng的话，你在电泳上是观察不到的，但是SYBRGreen染色的情况下，定量PCR可以检测到。你具体PCR的条件我不是很清楚，但是你可以考虑通过以下几个方面来优化，一个是延长解链时间，保证DNA的充分解链，延长扩增时间，保证扩增的完整性，提高退火温度，减少引物和模板的非特异性结合。此外，你的RNA在反转录前用DNase处理，减少基因组的污染，也有助于提高扩增的特异性。你如果检测相对表达，最理想的状态，干脆用特异性引物来反转录，事实上，虽然很多人做相对定量都习惯于用随机引物或者是ologodT来反转录，但是从结果上讲，使用特异引物做反转录最后拿到的结果要更可靠，也更具有特异性。只是反转录的试剂消耗要加倍的，同一个样品你必须单独反转录内参基因和目的基因。如果你要检测其他目的基因，相应消耗。至于内参基因，一般动物细胞的那几个内参基因，Acin，Tubulin,RPL32之类的，最好你能预先检测一下，挑一个最稳定的出来。不要随便用，没有全部通用的内参基因的。………………详细资料请参考：on

内参基因定义是什么啊

可以鉴定出两种状态下

细胞

总RNA样品内A

基因

量的

差异

，但这个差异包含着误差：

1，总RNA量的不准确性，虽然用

分光光度计

计算了浓度，但实际上还是有误差的存在，对那些表达水平只差那么丁点儿的样品尤其关键；

2，细胞整体表达水平会在不同情况下有差异，比如说高氧状态下细胞分裂速度更快，此时细胞内绝大多数

基因表达

水平都上调了，那此时A基因的增加就包括了整体水平的增加量和氧

特异性

诱导产生的增加量。

所以，我们需要找个能够表现细胞整体表达状态的基因作为参照，用来扣除第2种误差，同时，该参照也可以减少第1种误差对实验结果的误导。

非常高兴能与大家分享这些有关“内参基因”的信息。在今天的讨论中，我希望能帮助大家更全面地了解这个主题。感谢大家的参与和聆听，希望这些信息能对大家有所帮助。